OZ Biosciences 提供模擬完全加工成熟mRNA定制。
憑借超過 15 年的核酸遞送專業知識，OZ Biosciences 有信心為您提供一流的服務來生產高質量的 mRNA。我們能夠合成微克到數克規模的定制 mRNA，從幾百個到幾千個堿基，進行各種修飾，包括帶帽的 5′ 末端修飾、內部修飾，例如 5-甲氧基尿苷（其他修飾的核苷酸也可用） ) 和 3′ 修飾，例如 poly-A 尾?？梢允褂?Cy5、Cy3 或其他選項進行熒光標記。我們還提供未修飾的 mRNA。
我們的服務包括：
– 基因合成、克隆和 DNA 模板生產
-體外轉錄合成mRNA
– 純化和質量控制
3種mRNA：
– Reporter gene mRNAs: 研究轉染效率的理想對照
– Genome editing mRNA: 用于 CRISPR 基因組編輯的 Cas9 mRNA
– Vaccine mRNAs: 作為免疫或疫苗研究的理想對照
mRNA 轉染具有以下幾個優點：
* 不需要核攝取 – 蛋白質直接在細胞質中表達
* 比DNA 轉染更快的蛋白質表達
* 無基因組整合
* 蛋白質表達與mRNA數量直接相關
* 非常適合轉染慢細胞或非分裂細胞
* 以完全不依賴啟動子的方式表達蛋白質
* 瞬時轉染：基于 mRNA 的蛋白質表達持續有限的時間
Reporter gene mRNAs(5moU): 研究轉染效率的理想對照
報告基因常用于細胞生物學研究。 OZ Biosciences 提供的報告基因 mRNA 可用作對照，以使用各種檢測方法研究哺乳動物細胞中的轉染和表達。 它們模擬完全加工的成熟 mRNA。
這些 mRNA 是通過體外轉錄產生的，并通過修飾的核苷酸加帽 (Cap1) 在 5′ 端穩定。它們在 3′ 末端包含一個 poly(A) 尾，并且還經過優化以提高穩定性和性能。它們用 5-甲氧基尿苷（5moU 取代 U）修飾以減少先天免疫反應。
技術要點：
*GFP mRNA 旨在產生高表達水平的綠色熒光蛋白。 它是哺乳動物細胞培養中常用的直接檢測報告基因，可產生亮綠色熒光，發射峰位于 509 nm。
*F-Luc mRNA旨在產生高表達水平的 FireFly 熒光素酶。它通常用于哺乳動物細胞培養以測量基因表達和細胞活力。它在底物熒光素存在下發出生物發光。
*Tomato mRNA旨在產生高表達水平的橙色熒光蛋白。檢測可以通過熒光或共聚焦顯微鏡來完成。生產的番茄的最大激發波長為 551-557 nm，最大發射波長為 579-583 nm。番茄表達水平也可以通過熒光激活細胞分選儀分析 (FACS) 進行監測。
*mCherry mRNA 編碼熒光蛋白 mCherry，該蛋白源自 DsRed，一種在Discosoma sp 中發現的蛋白質 。mCherry 是一種單體熒光團，在 587 nm 處具有峰值吸收，在 610 nm 處發射。它具有光穩定性和耐光漂白性。
*β-半乳糖苷酶 ( β-gal) mRNA，編碼細菌 LacZ基因的蛋白質產物。 β-gal催化β-半乳糖苷轉化為單糖。它是用于評估轉染效率的常用標記基因。
常用型號有：mRNA10-20、mRNA10-100、mRNA10-1000、mRNA11-20、mRNA11-100等，儲存：-80°C
應用：使用多種檢測方法在哺乳動物細胞中表達，包括熒光顯微鏡、定量熒光測定法和生物發光成像，以及熒光激活細胞分選 (FACS)。
推薦用于：轉染效率的陽性對照
Genome editing mRNA: 用于 CRISPR 基因組編輯的 Cas9 mRNA
質粒和病毒載體傳統上用于 CRISPR 基因組編輯以表達所需的蛋白質。然而，使用 DNA 代替 mRNA 存在風險：雙鏈 DNA 斷裂催化 DNA 在切割位點插入。在一些相當大的頻率下，蛋白質表達載體可以整合，這可以導致核酸酶或先前沉默的序列的連續表達。
現在 mRNA 正在成為基因組編輯的強大工具。由于沒有插入突變的風險，mRNA 用于瞬時表達所需的蛋白質。野生型 Cas9 mRNA 是一種穩定的非免疫原性信使 RNA (mRNA)，旨在產生高表達水平的野生型 Cas9 蛋白。它在由 RNA 指導序列描繪的目標位點處產生雙鏈斷裂。
該 mRNA 是通過體外轉錄產生的，通過修飾的核苷酸加帽在 5′ 端穩定，并在 3′ 端包含聚 (A) 尾。mRNACas9 經過優化，可提高穩定性和性能，并降低細胞先天免疫反應。
常用型號有：mRNA31-20、mRNA31-100、mRNA32-20、mRNA32-100、mRNA32-1000、mRNA33-20、mRNA33-100、mRNA30-1000、mRNA 31-1000等，儲存：-80°C
應用：對于 Cas9 mRNA：用于誘導 DNA 中的定點雙鏈斷裂。這些斷裂可分別通過非同源末端連接和同源重組導致基因失活或引入異源基因，為基因組編輯提供有效工具。
CRE mRNA類似于完全成熟的 mRNA，具有 5’cap1 結構和 3’polyA 尾，因此可以被核糖體翻譯。mRNA32 編碼 CRE 重組酶，該酶催化 loxP 位點之間的 DNA 重組。重組產物取決于 loxP 位點的位置和相對方向：
Vaccine mRNAs: 作為免疫或疫苗研究的理想對照
與傳統的 DNA 和基于病毒的方法相比，mRNA 疫苗具有多種優勢：
表達所需抗原并作為佐劑。
防止基因組整合的風險，不需要滅活病毒或病原體。
不需要核攝取 – 蛋白質直接在細胞質中表達
非常適合轉染慢細胞或非分裂細胞，如抗原呈遞細胞 (DC)
比 DNA 轉染更快的蛋白質表達
以完全不依賴啟動子的方式表達蛋白質
瞬時轉染：基于 mRNA 的蛋白質表達持續有限的時間
常用型號有：mRNA41-20、mRNA41-100、mRNA41-1000、mRNA42-20、mRNA42-100、mRNA42-1000等，儲存：-80°C
應用：
OVA mRNA 編碼 OVA 蛋白，OVA 蛋白是免疫和生化研究常用的抗原，也是已建立的氣道高反應性模型過敏原。
我們提供修飾的 OVA mRNA (5moU)和未修飾的 OVA mRNA ，它們通過體外轉錄產生，并通過修飾的核苷酸加帽 (Cap1) 在 5′ 端穩定。它們在 3′ 末端包含一個 poly(A) 尾。
– 外源未修飾的 mRNA激活先天免疫系統和細胞因子的產生，以影響誘導的免疫反應。
– 修飾的 mRNA (5moU-ref# mRNA41) 用 5-甲氧基尿苷修飾。這種核苷修飾增強了 mRNA 的穩定性和翻譯能力，同時降低了其體內免疫原性。
